基于蛋白质热稳定性变化技术
利用小分子配体（探针或药物）与靶蛋白结合后，通常会改变靶蛋白自身热稳定性的特点；在此基础上，通过细胞热迁移实验（CETSA）结合质谱技术，即可系统性检测全蛋白质组中，因配体存在而发生热稳定性变化的蛋白（这类蛋白即潜在的配体作用靶蛋白）。
药物新靶点发现与机制研究Discovery of New Drug targets and mechanism research
技术平台
平台优势
√可在无修饰、接近生理环境的全细胞裂解物或活细胞中进行。
√无需预先设计特定探针（可直接测试药物分子）。
√能无偏性地发现配体的直接和间接作用靶点以及脱靶效应。
案例展示
项目需求：以热稳定实验，在细胞裂解液中，验证目标小分子与靶蛋白是否直接结合。
解决方案：分别利用免疫印迹（图1）和温度梯度的蛋白质热稳定性分析TPP-TR（图2）、小分子浓度梯度的蛋白质热稳定性分析TPP-CCR（图3），对目标蛋白的热稳定性进行分析。
数据展示：
相关文献
※采用METAL-TPP技术实现全蛋白质组水平金属结合蛋白（MBPs）的无标记筛选，发现锌离子抑制GFPT2酶活并调控己糖胺通路。本研究为北京大学王初教授（科络思生物首席科学家、联合创始人）课题组工作。Discovery of metal-binding proteins by thermal proteome profiling .Nat Chem Biol, 2024, 20, 770–778.(IF: 13.5)
※热蛋白质组分析（TPP）揭示衣康酸（itaconate）通过共价修饰KEAP1（Cys151）激活NRF2抗氧化通路，并靶向代谢酶ACLY、SDH重塑巨噬细胞免疫代谢网络，实现抗炎与氧化应激防御双重调控。本研究为北京大学王初教授（科络思生物首席科学家、联合创始人）课题组工作。Thermal proteome profiling of itaconate interactome in macrophages. Chem Sci. 2025 ;16(30):13838-13846.(IF:8.9)
