产品系列三:生物正交偶联反应试剂盒
生物正交偶联反应包括多种类型,其中Staudinger偶联反应、铜催化炔烃-叠氮环化反应(CuAAC)、张力驱动的[3+2]反应(SPAAC)和四嗪参与的Diels-Alder反应(IEDDA)应用最为广泛。
CuAAC反应形成1,4-双取代三氮唑连接单元,在尺寸和几何结构上,都与酰胺键类似,同时具有更高的热稳定性和化学稳定性,且该反应能在水相中快速进行,通常不会生成副产物且能够兼容多数官能团。通过调控不同配体,还原剂及比例关系,能够在均相和非均相的反应体系中高效催化炔基-叠氮偶合反应,应用于蛋白质荧光标记,固载分离等方面。无铜催化的反应,包括SPAAC和IEDDA,尤其适用于活细胞体系,对细胞损伤很小,因此在活细胞成像,细胞表面多糖标记等方面均有应用。
除此之外,公司开发了多种磁珠产品,用于富集分离化学探针修饰的生物分子。
代表性产品如下:
产品货号
产品名称
产品用途及特点
产品规格
产品说明书
02030001
ChomiX®-ClickKit-Cu/BTTAA
点击化学试剂盒
本产品是基于BTTAA配体的铜催化点击化学反应试剂盒,BTTAA是新一代点击化学反应配体,水溶性强,催化效率高。适用于均相水溶液的CuAAC反应,将炔基(或叠氮)标记的大分子与叠氮(或炔基)标记的报告基团(如生物素、荧光分子等)进行偶联,用于蛋白质富集或荧光成像等方面。
注:若您的实验目的是将炔基标记的蛋白质通过click反应偶联生物素或荧光报告基团,推荐根据实验检测目的,直接选购02030011、02030012、02030013 试剂盒。
100次
02030002
ChomiX®-Magbeads
链霉亲和素磁珠
生物素标记大分子富集分离,具有优良的再分散稳定性、磁稳定性,有效确保高的蛋白结合率和低非特异性吸附
1ml/2ml/5ml/10ml
ChomiX®-Magbeads
叠氮磁珠,PEG连接基团
本产品为叠氮分子修饰的磁珠,通过不可切割的聚乙二醇PEG链连接。
本产品中PEG链具有亲水性强,化学稳定性高等特点,保证叠氮分子均匀分布在磁珠表面,通过生物正交化学偶联反应,能够将炔基修饰的小分子,蛋白质,核酸,抗体及糖等分子,偶联在磁珠表面,从而实现分离富集的目的。
主要应用场景为,后续进行on-bead酶切和通过质谱鉴定蛋白。
相比于传统的“与叠氮-生物素click → 蛋白沉淀 → 复溶 → 链霉亲和素富集 ”策略,本方法通过一步click反应将炔基标记的蛋白富集至磁珠。
优点为:1)大大简化简化实验流程;2)避免了蛋白在沉淀和复溶过程中的损失;3)避免了高丰度的链霉亲和素在on-bead酶切过程中释放肽段污染样本的问题。
注:1)蛋白无法从磁珠上释放,不可用于Pulldown-Western blot 研究;2)推荐与“02030008 ChomiX®-ClickKit-Cu/BTTAA/TCEP点击化学试剂盒” 联合使用
02030006
ChomiX®-Agaroseresins
叠氮树脂,酸切割连接基团
酸切割连接基团的结构经过优化,具有很高的亲水性,防止在溶液中聚集,能够高效的分离富集炔基修饰的分子,包括小分子,蛋白质,核酸,抗体及糖等,利用温和的酸性条件即可将目标分子从树脂上释放。
主要应用场景为,1)通过酸切割释放蛋白;2)进行on-bead酶切和LC-MS/MS分析鉴定蛋白,以及进一步通过酸切割释放与探针相连的肽段并通过LC-MS/MS分析鉴定探针修饰位点。相比于传统的“与叠氮-生物素click → 蛋白沉淀 → 复溶 → 链霉亲和素富集 ”策略,本方法通过一步click反应将炔基标记的蛋白富集至磁珠。
优点为:1)大大简化简化实验流程;2)避免了蛋白在沉淀和复溶过程中的损失;3)避免了高丰度的链霉亲和素在on-bead酶切过程中释放肽段污染样本的问题;4)相比于通过gel loading buffer 煮beads释放蛋白,本方法通过酸切割释放蛋白,特异性更高。
注:1)若需对酸切割释放的蛋白溶液开展 SDS-PAGE 分析,建议通过超滤法将酸性溶液置换为中性缓冲液,或经多次旋转浓缩去除体系中的甲酸。2)推荐与“02030007 ChomiX®-ClickKit-Cu/TBTA点击化学试剂盒” 联合使用
0.2ml/2ml/5ml
ChomiX®-ClickKit-Cu/TBTA
点击化学试剂盒
ChomiX®-ClickKit-Cu/BTTAA/TCEP点击化学试剂盒
本产品是基于BTTAA配体的铜催化点击化学反应试剂盒,BTTAA是新一代点击化学反应配体,水溶性强,催化效率高,广泛应用于蛋白质组学,荧光成像等方面。
推荐与“02030004 ChomiX®-Magbeads 叠氮磁珠,PEG连接基团”联合使用
02030009
ChomiX®-CAT-Lyso
活细胞溶酶体蛋白标记试剂盒
本产品是基于CAT-Lyso技术的活细胞溶酶体蛋白标记试剂盒,应用于溶酶体蛋白质成像和基于蛋白质组学的系统性表征等方面研究中。
20次
ChomiX®-Magbeads SP3蛋白质组
预处理磁珠
ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click-Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒
该技术首先通过炔基化学探针(光亲和或共价反应探针)标记目标蛋白,随后利用点击化学反应(click chemistry)偶联生物素报告基团,并借助链霉亲和素磁珠实现特异性富集。富集后的复合物可根据下游分析需求选择不同路径:可将蛋白从磁珠上洗脱,经SDS-PAGE分离后进行Western blot分析,用于验证富集效果或特定靶蛋白;或同样经SDS-PAGE分离后,进行胶内酶切及质谱检测以鉴定结合蛋白。也可对富集后的样品进行on-bead酶切,随后通过质谱进行蛋白质组学检测以鉴定小分子结合蛋白。
注:在本实验之前,确保已经通过预实验确认探针(Probe)能够标记蛋白。推荐使用ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click(Biotin 或 TAMRA)试剂盒(对应产品货号02030012或02030013)进行该预实验测试。
ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click(Biotin)试剂盒
检测炔基化学探针(光亲和化学探针或共价反应化学探针)对蛋白质的标记效果。主要流程包括化学探针标记,基于点击化学(Click)反应的生物素报告基团偶联,后续可用于Western blot分析化学探针标记信号,评估化学探针是否能够标记蛋白及标记强度。
注:1. 本试剂盒经过多次验证,操作简单稳定,可直接应用于实验。如需要使用阳性化学探针作为对照,推荐使用靶向蛋白质半胱氨酸残基的通用型共价标记炔基探针IA-alkyne (货号02010025)作为标记和点击化学反应的阳性对照Probe,或使用脱氧胆酸光亲和探针CMX-Q-013 (货号02010152)作为细胞水平光交联阳性对照。
2. 本反应的若需要将点击化学反应后的样品进行探针标记蛋白富集和后续质谱检测,推荐使用“ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click-Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒”(对应产品货号02030011)
ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click(TAMRA)试剂盒
检测炔基化学探针(光亲和化学探针或共价反应化学探针)对蛋白质的标记效果。主要流程包括化学探针标记,基于点击化学(click)反应的生物素报告基团偶联,后续可用于胶内荧光成像检测化学探针标记信号,评估化学探针是否能够标记蛋白及标记强度。
注:1. 本试剂盒经过多次验证,操作简单稳定,可直接应用于实验。如需要使用阳性化学探针作为对照,推荐使用靶向蛋白质半胱氨酸残基的通用型共价标记炔基探针IA-alkyne (货号02010025)作为标记和点击化学反应的阳性对照Probe,或使用脱氧胆酸光亲和探针CMX-Q-013 (货号02010152)作为细胞水平光交联阳性对照。
2. 本反应的若需要将点击化学反应后的样品进行探针标记蛋白富集和后续质谱检测,推荐使用“ChomiX®-炔基标记蛋白质Extract-Click-Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒”(对应产品货号02030011)
ChomiX®-生物素共价标记(in situ)蛋白质Extract-Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒
在活细胞中进行生物素共价标记(例如,通过TurboID/APEX2等酶或生物素-共价小分子探针进行生物素标记)后,使用本试剂盒进行细胞裂解、标记蛋白质富集。富集后的复合物可根据下游分析需求选择不同路径:可将蛋白从磁珠上洗脱,经SDS-PAGE分离后进行Western blot分析,用于验证富集效果或特定靶蛋白;或同样经SDS-PAGE分离后,进行胶内酶切及质谱检测以鉴定结合蛋白。也可对富集后的样品进行on-bead酶切,随后通过质谱进行蛋白质组学检测以鉴定小分子结合蛋白。
注:如生物素探针与蛋白质结合是非共价亲和力,则不适用于本试剂盒。
ChomiX®-生物素共价标记(in vitro)蛋白质Extract-Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒
在蛋白质样品溶液中进行生物素共价标记(例如,使用Biotin-azide/alkyne/NHS/iodoacetamide/maleimide等探针)后,使用本试剂盒进行蛋白质沉淀复溶去除游离生物素探针和标记蛋白质富集。富集后的复合物可根据下游分析需求选择不同路径:可将蛋白从磁珠上洗脱,经SDS-PAGE分离后进行Western blot分析,用于验证富集效果或特定靶蛋白;或同样经SDS-PAGE分离后,进行胶内酶切及质谱检测以鉴定结合蛋白。也可对富集后的样品进行on-bead酶切,随后通过质谱进行蛋白质组学检测以鉴定小分子结合蛋白。
注:如生物素探针与蛋白质结合是非共价亲和力,则不适用于本试剂盒。
ChomiX®-生物素探针非共价结合蛋白Pulldown(链霉亲和素磁珠)试剂盒
适用于将“活性分子-生物素”探针的非共价互作蛋白质从细胞裂解液中富集分离和洗脱。富集后的复合物可根据下游分析需求选择不同路径:可将蛋白从磁珠上洗脱,经SDS-PAGE分离后进行Western blot分析,用于验证富集效果或特定靶蛋白;或同样经SDS-PAGE分离后,进行胶内酶切及质谱检测以鉴定结合蛋白。也可对富集后的样品进行on-bead酶切,随后通过质谱进行蛋白质组学检测以鉴定小分子结合蛋白。
注:为防止蛋白变性,细胞裂解液体系中禁止使用SDS、尿素、盐酸胍等蛋白变性剂,且实验全程细胞裂解液尽量保持在冰上或4°C操作。
申请试用装请联系:025-86608859
产品价格
730元
1000元/1500元/3300元/5250元
02030004
0.5ml/2ml/5ml
310元/1000元/2000元
产品说明书
400元/3200元/7200元
02030007
优化的配体和各组分比例,适用于非均相炔基CuAAC反应,将生物大分子固载。推荐与“02030006 ChomiX®-Agaroseresins叠氮树脂,酸切除连接基团”联合使用。
100次
650元
产品说明书
02030008
100次
730元
产品说明书
2000
02030010
本产品是基于亲水捕获机制,类似于亲水相互作用色谱(HILIC),利用亲水性基团修饰的磁珠,实现溶液中的蛋白质和多肽的高效回收。
0.2ml/1ml/5ml/10ml
试用装/300元/1100元/2000元
产品说明书
02030011
10次
3800元
产品说明书
02030012
100次
1000元
产品说明书
02030013
100次
1000元
产品说明书
02030014
10次
3600元
产品说明书
02030015
10次
3600元
产品说明书
02030016
10次
3500元
产品说明书